Protokoll for NIH 3T3

Protokoll for NIH 3T3


NIH3T3 celler er i utstrakt bruk i forskningslaboratorier for virologi, celle og molekylærbiologi eksperimenter. Musen embryonale fibroblast cellelinje ble utviklet av George Todaro og Howard Grønn i 1962 ved New York University.

Medium

NIH3T3 celler vokse festet til plast retter i en 37 grader Celsius inkubator (99 grader Fahrenheit). Deres vekst medium er Dulbeccos modifiserte Eagles medium supplementert med 10% kalveserum - ikke den 10% føtalt bovint serum som andre cellelinjer foretrekke.

formering

Del NIH 3T3 celler hver 2 til 3 dager - det er viktig at de ikke få lov til å bli for tett. Fjern det brukte kulturmediet og vaskes formen med fosfatbufret saltvann. Inkuber cellene i trypsin å løsne cellene og overvåke avløsning med et mikroskop. Når cellene er avrundet og separeres, forsiktig omrøre dem med en pipette. Legg komplett vekstmedium for å stoppe den enzymatiske reaksjonen. Re-plate cellene på 300.000 celler per 10 cm (3,9 inches) parabolen.

Bruker

NIH3T3 brukes til å dyrke Murine Leukemia Virus eller funksjon som immobiliserte celler, eller næringslag, som leverer nødvendige vekstfaktorer for celler slik som stamceller og keratinocytter. De ble dyrket på edderkopp silke i eksperimenter designet for å oppdage biomaterialer med potensial for vev gjenfødelse.