autoradiografi Protocol

Forskere rutinemessig merke molekyler med radioisotoper til å spore dem eksperimentelt. Autoradiografi er en metode som benytter røntgenfilm, som er følsom for betapartikler og gammastråling, å visualisere posisjonen av disse radioaktive molekyler i et eksperiment.

Eksempel

Molekylærbiologer bruker radioisotoper for å finne bestemte sekvenser av DNA. DNA-fragmenter kan bli separert ved størrelse i geler med et elektrisk felt, og på samme måte overføres til en tynn membran. En radio-merket DNA-fragment med kjent sekvens, eller en sonde, binder seg til identiske sekvenser på membranen. Å utsette membranen for røntgenfilm viser nøyaktig plassering av disse radioaktive sekvenser på membranen.

autoradiografi

I et mørkerom, blir filmen plassert på toppen av membranen og forseglet i en kassett, en metallbeholder for å hindre eksponering for lys, for lagring. Eksponeringstiden avhenger av intensiteten av sonden. Etter eksponeringen blir filmen fjernet fra kassetten i mørkerommet, og plassert i en automatisk film utvikler.

intensive~~POS=TRUNC

Forsterkningsskjermer, som slipper ut fotoner når truffet av partikler, kan anvendes sammen med høyere energi isotoper for å forsterke signalet på filmen. Filmen er klemt mellom membranen og skjermen som er lagt inn i en kassett og lagret ved -112 grader Fahrenheit til den er utviklet.