Hvordan bruke Bakterier i Genetic Engineering

Bakterier er nyttige verktøy i genmodifisering. Gjennom bruk av plasmider, sirkulære partier av utskiftbare bakterielt DNA, organismer, for eksempel andre bakterier, kan transformeres genetisk. Denne veiledningen beskriver de grunnleggende metoder som er involvert i å bruke bakterier for genteknologi fra en annen organisme.

Bruksanvisning

Forbereder genet av interesse

1 Skaff en prøve av de første bakteriearter ved swabbing vedlagte koloni med en steril løkke.

2 Wave inokulert sløyfe i et reagensrør gjennom et vannbad ved ca. 48 ° C i fem sekunder.

3 Tilsett noen milliliter restriksjonsenzym til den prøverør og oppvarmet, inokulert sløyfe. Dette restriksjonsenzym varierer avhengig av genet av interesse som vil bli overført til de andre bakteriearter.

Omforme andre bakterier Species

4 Dypp en andre steril løkke til en koloni av andre bakterier arter, den som skal transformeres.

5 Spre bakterier jevnt over en petriskål med agarose medium ved å skyve det inokulerte løkken over agarose.

6 La bakterier inkuberes i to dager i en inkubator, slik at bakteriekolonier er dannet.

7 Tilsett blandingen opprettet tidligere inneholdende genet av interesse til petriskålen inneholdende bakteriekolonier.

8 La bakterier inkuberes i to dager i kuvøse. Dette gjør arten til opptak genene lagt til parabolen og sette dem inn i sine genomer.

9 Tenke ut en metode for å teste de transformerte bakterier for å se om de assimilert genene. For eksempel, dersom genet lagt gir bakteriene antibiotisk resistens, kan det være hensiktsmessig å legge skiver av ampicillin til agarplaten. Hvis de overlever, tok de opp genet.

Hint

• Når du velger et gen som skal brukes for transformasjon, velge et gen som kan tas fra en annen bakterie enkelt.
• Sørg også for å plukke et gen som kan testes for å se om prosedyren virket. For eksempel, et gen som gjør at bakterier gløden er lett testbar av syne.
• Vær ekstremt forsiktig når du arbeider med bakterier, dødelige eller ikke-dødelige.
• Vask hendene med antibakteriell såpe før, etter og under arbeid med bakterier i genteknologi.