Luciferase Transfeksjon Protocol

Firefly bioluminesens har alltid fanget menneskelig fantasi. I 1986 forskere ved University of California, San Diego, fanget den genetiske og kjemiske prosessen for bruk av molekylærbiologer. De fant at ildflue luciferase konverterer luciferin til oxy-luciferase og produserer bioluminescence.

definisjoner

Et gen - en sekvens av deoksyribonukleinsyre (DNA) i celler - frembringer et spesifikt protein, i dette tilfellet luciferase. Luciferase-genet kan isoleres og plasseres i en liten del av DNA - et plasmid - for transfeksjon inn i en celle. En promotor er en DNA-sekvens som styrer mengden av luciferase produsert av genet.

metoder

Transfeksjonsmetoder - måter å sette plasmider i celler - kan variere i henhold til forsøket. Salter, lipider og elektrisk kraft er måter å lage hull som gjør at luciferase plasmid å gå inn i cellen og produserer luciferase. De nødvendige reagenser kan fremstilles i laboratoriet eller kjøpt som byggesett.

Bruker

Luciferase reporter-test ved molekylærbiologer å karakterisere styrken av forskjellige promotorer i luciferase-plasmider. Mengden av biolumine produsert etter transfeksjon er proporsjonal med promoter styrke, noe som er viktig i forskning og industri hvor øket proteinproduksjon er fordelaktig.